實(shí)驗(yàn)室常用耗材的使用注意事項(xiàng)要知道

一液相色譜柱

關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門學(xué)問。

高效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過濾流動(dòng)相和樣品，凈化樣品，避免過高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時(shí)的沖洗等。

關(guān)于液相色譜柱的使用注意事項(xiàng)，一般有以下6個(gè)要點(diǎn)： 

1.加裝保護(hù)柱

保護(hù)柱的作用是過濾掉來自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾"同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護(hù)分析柱的措施。

保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時(shí),應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

2.過濾流動(dòng)相和樣品

流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機(jī)溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過濾,但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有機(jī)溶劑用色譜純級(jí),水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有機(jī)溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時(shí),過濾并無(wú)更多實(shí)際意義。

當(dāng)流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應(yīng)重新過濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。

3.凈化樣品

當(dāng)樣品中含有對(duì)色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機(jī)分子和強(qiáng)吸附性物質(zhì),以及可能對(duì)柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對(duì)樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過高柱壓

雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000 p si (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。

(2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱最高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí),更應(yīng)降低使用溫度。

溫度過高會(huì)加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

目前的鍵合硅膠色譜柱標(biāo)示的pH適用范圍可達(dá)2～10,但在實(shí)際使用時(shí)應(yīng)避免pH條件,特別是在偏堿性的條件(pH≥8)下使用 ,如必須要在pH條件下使用時(shí),可通過以下方法避免柱損害:

(1)在泵和進(jìn)樣閥之間加裝預(yù)柱(飽和柱)來飽和流動(dòng)相

(2)降低使用溫度

(3)檢驗(yàn)完畢后立即用與所使用的流動(dòng)相互相混溶的“溫和溶劑"*清洗。

6.正確及時(shí)的沖洗

開始試驗(yàn)前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對(duì)于新色譜柱,如無(wú)特殊說明均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所用流動(dòng)相。柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。

二氣相色譜柱

為了避免柱后被沖開和柱內(nèi)擔(dān)體塌陷,通氣時(shí)緩慢升至所需柱前壓。為避免檢測(cè)器被污染,老化時(shí)請(qǐng)不要將色譜柱和檢測(cè)器相連。當(dāng)柱箱溫度高于室溫時(shí), 載氣中少量氧會(huì)損壞色譜柱內(nèi)的固定相, 載氣必須采用脫氧管進(jìn)一步脫氧(建議所用載氣中氧氣含量不要超過1ppm) 。

安裝色譜柱時(shí), 產(chǎn)品牌號(hào)應(yīng)面向操作者, 左側(cè)為色譜柱的進(jìn)樣口。拆卸色譜柱時(shí), 應(yīng)先將柱溫降至室溫, 然后再關(guān)載氣 。

使用毛細(xì)管色譜柱時(shí)的注意事項(xiàng)

毛細(xì)管色譜柱在氣相色譜儀分析中是一個(gè)核心部分,正確使用毛細(xì)管色譜柱對(duì)氣相色譜儀分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和延長(zhǎng)毛細(xì)管色譜柱的使用壽命至關(guān)重要:載氣必須采用脫氧管進(jìn)行進(jìn)一步脫氧 (建議所用載氣中氧氣含量不要超過PPM) ;拆卸色譜柱時(shí)先要將柱溫降至室溫,然后再關(guān)載氣;

安裝完色譜柱后, 要先通載氣將柱內(nèi)的空氣置換干凈后再升柱溫;儀器載氣管路使用金屬管,使用前一定要進(jìn)行檢漏;請(qǐng)?jiān)诓蛔龇治鰰r(shí)將柱溫降到100度以下,可延長(zhǎng)色譜柱使用壽命;

三SPE固相萃取小柱

SPE固相萃取柱適合不同體積樣品處理，SPE小柱也可根據(jù)客戶的需求加工定制。自產(chǎn)的SPE小柱回收率高、流速適中、吸附量大、重現(xiàn)性好、性價(jià)比高、比國(guó)內(nèi)同類產(chǎn)品有更高的重復(fù)性和一致性。在環(huán)境水體污染物的萃取、生命科學(xué)、食品農(nóng)殘和獸殘以及動(dòng)植物提取等方面可以達(dá)到的效果。

SPE固相萃取柱的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。對(duì)于以硅膠為基質(zhì)的固相萃取柱，其容量一般在1~5 mg/100 mg，也就是柱容量是填料質(zhì)量的1%~5%。而鍵合硅膠離子交換吸附劑填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量為X毫克當(dāng)量。這類填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g。SPE固相萃取柱為樣品分析前的儲(chǔ)備提供快速和有效的純化和濃縮，為使這些產(chǎn)品獲得的分析結(jié)果需要注意以下四個(gè)方面：

1、樣品的物理和化學(xué)特征：影響因素如被分析物相對(duì)與介質(zhì)的極性，帶電荷的官能團(tuán)，溶解性，分子量，等等，決定了被分析物與填充床的結(jié)合強(qiáng)度。

2、選擇適當(dāng)?shù)谋Ａ舴椒ǎ嚎赡艿姆椒ㄓ袃煞N：第一，被分析物不保留與填充床，而干擾物保留，如此純化了樣品。第二，被分析物保留與填充床，而干擾物不保留，或者在樣品洗脫前先從填充床上洗脫。當(dāng)樣品需要濃縮時(shí)，常用的方法為第二種方法。

3、選擇適當(dāng)?shù)奶畛淞虾吞畛浯泊笮。翰煌奶盍项愋吞峁┎煌倪x擇性。填料類型應(yīng)最大的利用被分析物和樣品中的干擾物的結(jié)構(gòu)差異。選擇有適當(dāng)選擇性的填料能獲得最高的回收率和最高純度的樣品和提取物。當(dāng)填充床的大小未經(jīng)優(yōu)化時(shí)，通常有回收率低的問題。填充床太大時(shí)會(huì)導(dǎo)致洗脫不*，而填充床太小時(shí)會(huì)導(dǎo)致保留不*，兩種情況都是回收率比預(yù)期的低。

4、選擇合適的調(diào)節(jié)，沖洗和洗脫溶劑：必須注意各類溶劑相對(duì)于填料的洗脫強(qiáng)度上樣的樣品調(diào)節(jié)溶劑應(yīng)是沒有洗脫作用的“弱溶劑"，必須使用緩沖也來控制潛在的帶電荷化合物的離子化程度。沖洗溶劑應(yīng)將弱保留的干擾物洗脫，但是洗脫強(qiáng)度不應(yīng)太強(qiáng)而導(dǎo)致被分析物洗脫。洗脫溶劑的強(qiáng)度應(yīng)足夠使被分析物在較小的體積下（1-2ml）*洗脫。

化合物在溶劑中的溶解性是一個(gè)重要的參數(shù)。一種溶劑如果不溶解被分析物而溶解樣品中的干擾物，那么它是一種的沖洗溶劑，但是不能作為洗脫溶劑。

SPE固相萃取柱產(chǎn)品用途：用于樣品的預(yù)處理，通過樣品的分離，純化和濃縮，提高樣品進(jìn)行的液化、氣象分析的速度，去除雜志，延長(zhǎng)色譜設(shè)備的使用壽命，避免色譜系統(tǒng)的污染。

四液體自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶

1、樣品瓶蓋要蓋緊，如果太松的話，進(jìn)樣針穿不透樣品瓶的瓶墊而把其插入瓶?jī)?nèi)，會(huì)導(dǎo)致取樣失敗；

2、樣品瓶不要裝得過滿，一般來說瓶?jī)?nèi)液面應(yīng)保持在瓶?jī)?nèi)三分之二高度以下。如果液面過高，進(jìn)樣體積又比較大時(shí)，密封的樣品瓶?jī)?nèi)易產(chǎn)生負(fù)壓，影響進(jìn)樣針準(zhǔn)確的抽取液體，甚至在針內(nèi)產(chǎn)生氣泡，從而導(dǎo)致進(jìn)樣重復(fù)性不好；

3、樣品寶貴或樣品量有*，可使用樣品瓶?jī)?nèi)插管或高回收率樣品瓶，也可調(diào)節(jié)取樣時(shí)樣品針尖的位置，以大限度的利用有限的樣品；

4、針尖的位置下到離瓶底只有0.5mm時(shí)，要注意使用規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的樣品瓶，避免針尖戳到瓶底，損壞進(jìn)樣針；

5、選用規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的樣品瓶，避免取樣出錯(cuò)或失敗，甚至損傷進(jìn)樣針。

五針頭過濾器

1、新的針頭過濾器必須用清潔劑清洗干凈洗凈后用高溫蒸汽殺菌、消毒、洗凈的濾器要放好，避免污染。

2、針頭過濾器使用前必須檢查配件和密封圈是否齊全，有無(wú)損壞，然后按要求把它裝好。

3、筒體的壓力表是液體壓力顯示表，如果是二級(jí)過濾，針頭過濾器壓力表指數(shù)稍少一些是正常現(xiàn)象，使用時(shí)間越長(zhǎng)，他們的壓力會(huì)增大，流速減少，這說明濾芯空隙大多已被堵塞，要沖洗或者更換新的過濾芯。

4、針頭過濾器的安裝時(shí)進(jìn)出口不要接反，管道濾器底板邊上的口是液體進(jìn)口處，管道接在濾芯插口的管子是干凈液體出口處。

5、濾芯插入口時(shí)，濾芯一定要垂直，插入口后壓板扣住翅片，扭緊螺絲不動(dòng)即可。接口的濾芯入口后，應(yīng)旋轉(zhuǎn)90度卡緊，這是安裝中的關(guān)鍵，如果有一點(diǎn)不小心，就會(huì)達(dá)不到密封，容易漏水，就達(dá)不到你的使用要求。

6、新的濾芯是生產(chǎn)廠家在潔凈的生產(chǎn)廠房?jī)?nèi)用塑料袋封裝的未使用切勿撕破塑料包裝，使用要求較高的濾芯，安裝好后要經(jīng)過高溫蒸汽殺菌消毒。

7、需要過濾的液體進(jìn)入時(shí)，應(yīng)打開針頭過濾器上面的放氣開關(guān)，讓液體充滿柱體，否則過濾效果不好。

六離心管

一、高速冷凍離心機(jī)

1.  未經(jīng)過培訓(xùn)和考核者不能使用。

2.  選擇合適的轉(zhuǎn)頭和轉(zhuǎn)速，絕不可*速使用。

3.  選擇合適的溫度，通常4℃，除有機(jī)溶劑外不要低于零下，以免冰凍，損壞離心管和轉(zhuǎn)頭。

4.  轉(zhuǎn)頭使用前必須用擦孔棒將管空擦凈，并仔細(xì)檢查有無(wú)裂痕和孔底白斑。若有，轉(zhuǎn)頭報(bào)廢。

5.  離心管內(nèi)裝載的溶液量必須合適。不銹鋼管無(wú)蓋，只能裝2/3，塑料管可裝至肩部。管蓋必須蓋嚴(yán)絕不允許漏液。空管離心會(huì)變形。塑料管使用有機(jī)溶劑必須符合規(guī)定。

6.  離心管必須成對(duì)放置，必須嚴(yán)格平衡，偏差<0.1g 。

7.  不允許無(wú)轉(zhuǎn)頭空轉(zhuǎn)，放取轉(zhuǎn)頭必須用手柄以防轉(zhuǎn)頭滑落。轉(zhuǎn)頭要輕放、卡穩(wěn)，旋下手柄時(shí)要用手扶住手柄只轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)頭蓋要蓋嚴(yán)，無(wú)蓋不準(zhǔn)離心。

8.  離心時(shí)不準(zhǔn)打開機(jī)蓋，不準(zhǔn)扒扶在離心機(jī)上，如有異常聲音和振動(dòng)時(shí)立即停機(jī)。

9.  轉(zhuǎn)頭使用后必須及時(shí)由轉(zhuǎn)頭艙中取出、擦干，用擦孔棒將管孔仔細(xì)擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈，擦凈轉(zhuǎn)頭艙內(nèi)凝水，開門晾干轉(zhuǎn)頭艙。

10. 使用離心機(jī)必須預(yù)約，用后必須登記。

二、普通離心機(jī)
1. 離心前必須仔細(xì)檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無(wú)異物。
2. 離心管必須仔細(xì)平衡。
3. 機(jī)艙內(nèi)若不清潔，離心管要用塑料薄膜封口。
4. 必須慢啟動(dòng)，然后加速。
5. 離心時(shí)不準(zhǔn)開蓋。

七滴定管

滴定管使用前必須試漏。方法是：滴定管活栓不涂油脂，注水至全容量，垂直靜置15min，所滲漏的水不超過最小分度值，即可使用。

2、向滴定管注入標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)，應(yīng)先用少量標(biāo)準(zhǔn)液把滴定管潤(rùn)洗2～3次。注入標(biāo)準(zhǔn)液至“0"刻度以上幾厘米，如是酸式滴定管，轉(zhuǎn)動(dòng)活栓使溶液急速充滿尖嘴，并不得存有氣泡；如是堿式滴定管，將乳膠管向上彎曲，擠捏管內(nèi)玻璃球，使溶液充滿膠管和玻璃尖嘴。調(diào)整滴定管內(nèi)液，使其處于“0"刻度。

3、讀數(shù)時(shí)，滴定管必須保持垂直。裝好或放出溶液后，應(yīng)靜置片刻，待附著在內(nèi)壁上的溶液流下之后再讀數(shù)。讀數(shù)者的視線必須與管內(nèi)液面的最凹點(diǎn)處于同一水平線上。標(biāo)準(zhǔn)溶液如是深色（如KMnO4溶液），讀數(shù)時(shí)可以凹液面兩側(cè)最高處與視線處于同一水平線為準(zhǔn)。最小分度如是0.1mL讀數(shù)時(shí)應(yīng)估讀至0.01mL。

4、滴定管用畢暫時(shí)不再使用時(shí)，應(yīng)洗凈并擦凈活栓，在活栓處應(yīng)墊一紙條，以防粘連。

八凍存管

1、使用凍存管儲(chǔ)存樣本時(shí)，嚴(yán)格要求應(yīng)把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存！如果凍存管儲(chǔ)存于液氮液體中，液氮有一定幾率會(huì)滲入凍存管內(nèi)部，復(fù)蘇時(shí)液氮?dú)饣瘜?dǎo)致管內(nèi)外壓力不平衡，這樣極易造成凍存管的炸裂，并具有生物危害性。

2、操作凍存管復(fù)蘇，全程使用安全防護(hù)設(shè)備，建議穿實(shí)驗(yàn)服、戴棉質(zhì)手套且在安全的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行操作。條件允許情況下，請(qǐng)佩戴護(hù)目鏡或防護(hù)面罩。由于夏季室內(nèi)溫度會(huì)高于冬季，請(qǐng)格外小心。

3、凍存細(xì)胞儲(chǔ)存過程中，凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會(huì)導(dǎo)致冰塞的產(chǎn)生，冰塞會(huì)抑制兩側(cè)的液體溫度傳遞進(jìn)而產(chǎn)生危險(xiǎn)的高壓力并導(dǎo)致凍存管受損。

4、凍存的樣本量不要超過凍存管要求的最大工作體積。

九比色皿

 1．拿取比色皿時(shí)，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，避免接觸光學(xué)面，用力不可過大。

2．不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時(shí)，高度為比色皿的2/3處即可，光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附，然后再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。

3．凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長(zhǎng)期盛放在比色皿中。

4．比色皿在使用后，應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時(shí)可用1：1的鹽酸浸泡，然后用水沖洗干凈。

5．不能將比色皿放在火焰或電爐上進(jìn)行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤；

6．在測(cè)量時(shí)如對(duì)比色皿有懷疑，可自行檢測(cè)。可將波長(zhǎng)選擇在實(shí)際使用的波長(zhǎng)上，將一套比色皿都注入蒸餾水，將其中一只的透射比調(diào)至95%（數(shù)顯儀器調(diào)置100%）處，測(cè)量其它各只的透射比，凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。

7、比色皿換向后誤差可達(dá)4％一7％左右。所以在準(zhǔn)確測(cè)量時(shí)；定要看準(zhǔn)比色皿箭頭標(biāo)志。如無(wú)標(biāo)志，可作配套檢定后按方向在毛玻璃上端作上箭頭一致的標(biāo)記。以避免操作時(shí)搞反。

8、比色皿使用時(shí)請(qǐng)勿碰撞。

十定性濾紙

定性濾紙是一種具有良好過濾性能的紙，定性濾紙紙質(zhì)疏松，對(duì)液體有強(qiáng)烈的吸收性能。分析實(shí)驗(yàn)室常用濾紙作為過濾介質(zhì)，使溶液與固體分離。

由于定性濾紙的特性，從而實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)院，工廠等各行各業(yè)的一些過濾都會(huì)用到定性濾紙，也是因?yàn)檫@樣才讓定性濾紙產(chǎn)量直線上升。

定性濾紙?jiān)谶^濾的過程中應(yīng)該注意的事項(xiàng),一般情況下,定性濾紙使用都不會(huì)在高溫下進(jìn)行過濾的,這個(gè)溫度有一個(gè)限度只要不超過就行了,別外不要過濾熱的濃硫酸或硝酸溶液熱的酸性可以破壞定性濾紙的過濾效果.

一般采用自然過濾，利用濾紙?bào)w和截留固體微粒的能力，使液體和固體分離；

定性濾紙?jiān)谶^濾機(jī)器中的使用,濾紙的機(jī)械強(qiáng)度和韌性都較盡量少用抽濾的辦法過濾，如必須加快過濾速度，為防止穿濾而導(dǎo)致過濾失敗，在氣泵過濾時(shí)，可根據(jù)抽力大小在漏斗中疊放2～3層濾紙，在用真空抽濾時(shí)，在漏斗上先墊一層致密濾布，再放濾紙過濾。